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技术支持

液相色谱仪检测牛奶中氯霉素
发布时间:2016-11-11   点击次数:1024次

      氯霉素是一种抗生素,对伤寒、百日咳、肺炎等具有良好的治疗作用,但长期使用可引发再生障碍性贫血,因而监控其在动物源食品中的残留对开展畜产品检测及保障食品安全工作有重大意义,可采用液相色谱仪检测牛奶中氯霉素

液相色谱仪检测牛奶中氯霉素仪器设备

液相色谱仪

紫外检测器,

SPE固相萃取装置

氮吹仪

超声清洗仪

涡旋振荡仪

离心机

 

试剂材料浓缩奶;氯霉素标品;甲醇(色谱纯);乙腈(分析纯);乙酸乙酯(分析纯)。

色谱柱:C18(5 μm,120 Å,4.6×250 mm,)

液相色谱仪检测牛奶中氯霉素样品制备

准确称取牛奶5 g(到0.001),加入乙酸乙酯15 mL,涡旋振荡1 min,摇床振荡10 min。3000 r/min离心10 min。将上清转移至试管,于45 ℃氮吹仪吹干,用5 mL乙腈-水溶液(5 : 95,v/v)再溶解,超声10 min,待净化。
SPE柱净化

  1. 活化:C18固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水活化。
  2. 上样:将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中,以1 mL/min的流速过柱,弃去滤液。
  3. 淋洗:用4 mL×2次乙腈-水溶液(5 : 95,v/v)淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,抽干10 min。
  4. 洗脱:用8 mL乙酸乙酯洗脱固相萃取小柱,收集洗脱液。
  5. 重新溶解:洗脱液于45℃氮吹吹干,加1 mL乙腈-水溶液(2 : 8,v/v),超声10 min溶解,0.45 μm微孔滤膜过滤,供液相色谱仪测定。


色谱条件

色谱柱:C18(5 μm ,120 Å,4.6×250 mm,)

检测器:UV3000型紫外/可见光检测器

检测波长:UV 268 nm 

流动相:甲醇/水 = 60/40(v/v)          

流速:0.8 mL/min

柱温:25 ℃                   

进样量:20 μL

采用此方法进行奶制品中氯霉素含量的液相测试,添加回收率达到97.24%,表明AE.SPE-C18 及C18适于乳制品中氯霉素的纯化和测试。

 

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