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技术支持

如何提高液相色谱柱柱效
发布时间:2017-01-17   点击次数:1577次

1、提高液相色谱柱柱效的方法

(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。

(2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。

(3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。

(4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。

(5)适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分离度也随之降低。

(6)尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。

  从以上介绍可看出,在色谱分析过程中,各种因素是互相和制约的。只有通过对柱效值的跟踪测算,对自己分析方法不断的研究和实践,才能找到zui佳的工作条件。

2、对柱效值进行跟踪测算应注意的问题

   我们也应记住柱效值并不足以预测在所有条件下的柱性能,对大多数色谱工作者来说,柱性能指的是色谱柱用于特定分离的能力,而仅仅有高柱效并不能保证这种分离能力。

  不管用什么特定的测试方法,都会有几个参数影响柱效的测定。这些参数包括:洗脱液的成分和粘度及其线流速,测定塔板数所用的溶质,温度,柱长,填料装填方式,颗粒度,还有所选用的测量和计算方法。而测量和计算方法对柱效值的确定起着极大的作用。

   假如一个色谱峰真是正态峰型,那么每种计算方法都会得到同样的结果。然而即使一些比较理想的仪器和倾向于得到对称峰型的溶质,由于柱内的槽或空隙,也会出现非正态峰型。所以不同的计算方法将会得到相差较大的n值。通常偏离正态模型的峰型表示为“前延”或“拖尾”。对于这些峰型,越在峰的高处测量,计算的理论塔板数值就越大(准确性越低)。在许多情况下,色谱工作者需要能反映整个峰型(包括拖尾)的柱效值,同时为了保证定量的重复性,也需要色谱峰很好的对称性。这时对色谱峰非对称性zui敏感的计算方法zui适合。如果目的仅仅是要监测色谱柱从*次使用到使用寿命结束这一过程中的柱效,那么以上任何一种方法都可以,应选择zui简便的方法。

 

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