等度高效液相色谱仪是一种基于液相色谱法原理设计的分析仪器，通过高压泵将流动相（如甲醇、乙腈等）以恒定流速泵入色谱柱，样品溶液经进样器注入后，随流动相进入色谱柱。由于样品中各组分在固定相（如C18、硅胶等）和流动相之间的分配系数不同，在色谱柱内经历反复的吸附-解吸过程，导致移动速度产生差异，从而实现分离。分离后的组分依次流入检测器（如紫外检测器、荧光检测器等），被转化为电信号并传输至记录仪，最终以色谱图的形式呈现，用于定量分析样品中的组分含量。
1、溶剂输送系统（高压泵与储液器）
储液器：用于储存流动相（如甲醇、乙腈、水等），通常采用1-2L玻璃瓶或不锈钢容器，配备耐腐蚀的镍合金过滤器（孔隙2μm），防止颗粒进入泵内。
高压泵：提供稳定的高压（通常60-300×10⁵Pa），将流动相以恒定流速（如1mL/min）泵入色谱柱。常见类型包括：
往复式柱塞泵：通过柱塞往复运动实现连续输液，流量恒定，抗溶剂腐蚀。
气动放大泵：利用低压气体推动活塞，输出高压液体，适用于高精度需求。
2、进样系统（进样阀或自动进样器）
六通进样阀：主流进样方式，通过旋转阀芯实现样品注入。分为：
部分装液法：进样量≤定量环体积的75%，依赖注射器熟练度，易产生峰展宽。
完q装液法：进样量≥定量环体积的3倍，确保完q置换流动相，提高重复性。
自动进样器：可编程控制进样体积、时间和顺序，支持批量样品分析，减少人为误差。
3、分离系统（色谱柱与保护柱）
色谱柱：分离核心，通常由不锈钢管制成，内径1-6mm，长度10-30cm，填充固定相（如C18、硅胶等）。固定相粒度5-10μm，理论塔板数可达1×10⁵/m。
保护柱：位于分析柱前，填充10-30μm颗粒，防止杂质污染分析柱，延长使用寿命。
柱温箱：维持色谱柱温度恒定（如25℃），避免温度波动影响保留时间。
4、检测系统（检测器与信号转换）
紫外吸收检测器（UV）：常用，通过检测样品对特定波长紫外光的吸收实现定量分析。
光电二极管阵列检测器（DAD）：可同时检测多波长，提供三维色谱图，用于峰纯度鉴定。
荧光检测器（FLD）：对荧光物质灵敏度高，适用于痕量分析（如多环芳烃）。
蒸发光散射检测器（ELSD）：适用于无紫外吸收的物质（如糖类、脂类）。
信号转换：检测器将组分浓度转化为电信号，传输至数据处理系统。
5、数据处理与记录系统
记录仪：实时记录色谱图，显示保留时间、峰高等参数。
数据处理装置：包括积分仪或计算机工作站，用于峰面积计算、定量分析、方法开发等。现代HPLC通常配备专业软件，支持梯度洗脱程序编辑、报告生成等功能。
