顶空气相色谱法测定药物中的有机溶剂残留

  采用气相色谱仪加FID检测器和顶空进样器测定原料药中残留量有机溶剂，是一种普遍采用的、稳定分析方法，同时具有较好的重现性和回收率。

  顶空气相色谱法的原理是：利用被测样品（气-液和气-固）加热平衡后，取其挥发气体部分进人气相色谱仪。它于分析易挥发的微量成分，如对甲醇、乙醇等许多易挥发的有机溶剂类；不同季节的花香气、香水类，带有易挥发成分的中草药类；特殊气味的蔬菜和调味品类等均可用它进行定量分析。顶空气相色谱与质谱联用法是用于对未知的挥发成分进行定性分析的方法。

仪器与试剂

1.仪器：气相色谱仪加FID检测器；弱极性或中等极性气相色谱柱；1-5uL微量注射器。

2.试剂：甲醇；乙腈；二氯甲烷；三氯甲烷；丙酮；正丙醇（均为分析纯）；地塞米松磷酸钠原料药。

气相色谱分析步骤

1.地塞米松磷酸钠中丙酮的检测

1.1溶液制备与测定

精密量取甲醇10μL（相当于7.9mg）与丙酮100μL（相当于79mg)，置于100mL容量瓶中，精密加0.1%(mL/mL）正丙醇（内标物质）溶液20mL，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品约0.16g，精密称定，置于l0mL容量瓶中，精密加入上述内标溶液2mL，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述溶液，照气相色谱法，按正丙醇计算的理论板数应大于700。含丙酮不得过5.0%(g/g)，并不得出现甲醇峰。

1.2计算

按下式计算定量校正因子（f）和检品中丙酮的含量：

定量校正因子（f)＝A丙醇/A丙酮×m丙酮/m丙醇

样品中丙酮的百分含量=供试品中丙酮峰面积/供试品中正丙醇峰面积×fm丙醇/样品取样量/10×100%

式中A——峰面积，cm2;

m——质量，g。

2.顶空气相色谱法测定有机溶剂甲醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷

2.1溶液制备

(1）取甲醇100μL、乙腈30μL、二氯甲烷10μL、三氯甲烷10μL，分别加不含有机物的纯水至100mL，作为定位溶液。

(2）另取上述同样量有机溶剂，混合，加无有机物的水至100.0mL，作为有机残留溶剂的限度试验对照溶液。取1mL对照溶液，加水至100.0ml,，测定有机溶剂的检测限。

(3)取某药物约0.3g，精密称定，加3.0mL无有机物的水使溶解［如果样品在水中不溶，可用适当浓度的二甲基甲酰胺（DMF）水溶液溶解样品］，作为供试品溶液。

 2.2分离度与系统适用性试验

取定位溶液在上述色谱条件下测定，记录色谱图和保留时间。取对照溶液重复进样，计算各成分峰的分离度、柱效及色谱峰面积的相对标准差。另取对照溶液的稀释液进样，计算药物中各有机溶剂的检测限。参照下表格式记录色谱参数：

 2.3计算含量

样品测定取供试品溶液，在上述色谱条件下进样，记录色谱图，外标法计算含量。

注意事项

1.气相色谱仪色谱柱的使用温度。各种固定相均有zui高使用温度的限制，为延长色谱柱的使用寿命，在分离度达到要求的情况下尽可能选择低的柱温。开机时，要先通载气，再升高汽化室、检测室温度和分析柱温度，为使检测室温度始终高于分析柱温度，可先加热检测室，待检测室温度近设定温度时再升高分析柱温度；关机前须先降温，待柱温降至50℃以下时，才可停止通载气、关机。

2.进样操作。为获得较好的气相色谱仪分析精密度和色谱峰形状，进样时速度要快而果断，并且每次进样速度、留针时间应保持一致。

3.检测器的使用。为避免被测物冷凝在气相色谱仪检测器上而污染检测器，检测器的温度必须高于柱温30℃，并不得低于100℃。FID点火时应关小空气流量和开大H2流量，待点燃后，慢慢调整到工作比例，一般空气与氢气的流量比为10:1，载气（N2）与H2的流量比为(1：1)-（(1：1.5)。用峰高定量时，需保持载气流速恒定。